lncRNA FAM27L对喉癌TU212细胞增殖和侵袭的影响及其分子机制

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA) FAM27L对喉癌TU212细胞增殖和侵袭的影响及其分子机制。方法qPCR检测FAM27L在喉癌组织、相应癌旁组织、喉癌细胞系及人支气管上皮细胞系中的表达。选取FAM27L表达最低的细胞系,构建FAM27L过表达细胞系(FAM27L组)和阴性对照细胞系(阴性对照组)。MTT法和Transwell实验分别检测过表达FAM27L对细胞增殖能力和侵袭能力的影响。采用生物信息学网站LncBase Predicted V.2预测可互补结合FAM27L的miRNA,采用网站miRWalk2.0预测可互补结合miRNA的基因。qPCR检测miRNA和靶基因mRNA的表达。Western blot法检测靶基因蛋白和MAPK信号通路蛋白的表达。结果 在喉癌组织中FAM27L的表达水平低于癌旁组织(P<0.01)。FAM27L在5种喉癌细胞系中的表达明显低于人支气管上皮细胞(P均<0.05),且以TU212细胞中表达最低(P<0.01)。过表达FAM27L后,与阴性对照组比较,FAM27L组TU212细胞的增殖能力和侵袭能力明显降低(P均<0.05)。LncBase Predicted V.2和miRWalk2.0网站预测显示,FAM27L可与miR-744-3p互补结合,miR-744-3p与核糖体蛋白L41(ribosomal protein L41,RPL41)存在靶向结合位点。与阴性对照组比较,FAM27L组miR-744-3p表达显著降低(P<0.01),RPL41及MAPK信号通路蛋白的表达显著降低(P均<0.05)。结论 FAM27L在喉癌组织和细胞系中低表达,高表达FAM27L可通过下调miR-744-3p的表达促进RPL41基因的表达,干扰MAPK信号通路转导,从而抑制喉癌TU212细胞恶性生物学行为的进展。     

微小 RNA?129?5p在喉鳞状细胞癌中的表达及对细胞增殖、侵袭的影响

目的 研究微小RNA-129-5p在喉鳞状细胞癌中的表达及对细胞增殖、侵袭的影响.方法 采用实时定量实时荧光定量PCR仪(RT-qPCR)检测喉鳞状细胞癌、癌旁组织及喉鳞状细胞癌Hep-2细胞中miR-129-5p表达水平,转染miR-129-5p模拟物(mimics)喉鳞状细胞癌Hep-2细胞设为mimics组,转染miR-129-5p mimics空白对照组(NC)喉鳞状细胞癌Hep-2细胞设为mimics-NC组,将未转染喉鳞状细胞癌Hep-2细胞设为NC组.采用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法、平板克隆试验检测各组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖情况;采用Transwell各组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞侵袭情况;采用蛋白质印迹法试验检测各组喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖、侵袭相关蛋白表达水平.结果 与癌旁组织(1.03±0.14)比较,喉鳞状细胞癌组织中miR-129-5p(0.48±0.08)表达水平显著降低(P<0.05).同一时间和不同时间NC组、mimic-NC组miR-129-5p表达水平、喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖抑制率、平板克隆形成率、侵袭细胞数、一抗鼠源原癌基因(c-Myc)、细胞周期蛋白D1(Cyclin D1)、基质金属蛋白酶2(MMP-2)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白水平比较差异无统计学意义(P>0.05).同一时间与NC组、mimics-NC组比较,mimics组miR-129-5p表达水平、喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖抑制显著增加(P<0.05),与24 h比较,48 h mimics组miR-129-5p表达水平、喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖抑制显著增加(P<0.05).平板克隆形成率为(98.96±10.60)％、(97.57±10.82)％、(46.91±9.03)％、侵袭细胞数为(235.62±36.18)、(227.31±35.90)、(94.38±19.86)个、c-Myc(3.92±0.71)、(3.89±0.60)、(2.18±0.46)、Cyclin D1(1.54±0.27)、(1.52±0.30)、(0.39±0.08)、MMP-2(1.12±0.28)、(1.11±0.25)、(0.36±0.07)、MMP-9(1.03±0.14)、(0.98±0.13)、(0.29±0.05)蛋白水平均显著降低(均P<0.05).结论 miR-129-5p在喉鳞状细胞癌组织中低表达,上调miR-129-5p可抑制喉鳞状细胞癌Hep-2细胞增殖及侵袭.     

成年男性OSAHS患者血清睾酮水平的研究

目的探讨成年男性阻塞性睡眠呼吸暂停低通气综合征（OSAHS）患者血清睾酮水平的变化。方法回顾性分析183例成年男性OSAHS患者,对照组60例均为正常健康成年男性,所有受试对象均接受多导睡眠监测（PSG）,按照年龄段分为25~40岁和41~55岁两段,按照呼吸暂停低通气指数（AHI）将OSAHS患者分型,其中轻度52例,中度58例,重度73例。测定其血清睾酮水平,分别比较同一年龄段OSAHS组和对照组血清睾酮差异,分析成年男性OSAHS患者血清睾酮水平的影响因素。结果同一年龄段内成年男性OSAHS患者血清睾酮水平均低于对照组,两组间比较差异具有统计学意义（P<0.05）;同一年龄段内成年男性OSAHS患者轻、中、重度各组间血清睾酮水平差异具有统计学意义（P<0.05）。结论成年男性OSAHS患者的血清睾酮水平低于正常健康成年男性,同一年龄层内成年男性OSAHS患者血清睾酮水平随着病情加重而逐步降低。     

显微支撑喉镜CO2激光治疗早期声门型喉癌临床疗效观察

喉癌是头颈部常见恶性肿瘤,占头颈肿瘤的第2位,占全身肿瘤的2%左右,以鳞状细胞癌最为常见.其中约60%为声门型,多发于男性,90%以上与长期吸烟有关.声门型喉癌早期常表现出声嘶,故易被早期诊断并治疗.传统喉癌外科治疗需要在气管切开的基础上,根据喉部肿瘤的大小及侵犯范围对应行相关开放性术式,如喉裂开声带切除术,垂直半喉切除术,扩大垂直半喉切除术,喉全切除术等术式,传统开放性手术存在创伤较大、术后恢复时间长、患者花费高、术后发音效果差等.近年来越来越多的国内外文献报道[1~4],CO2激光治疗早期声门型喉癌,具有创伤小、并发症少、术后恢复快、5年生存率及生存质量高等优点,近年来在国内逐渐开展起来.     

平阳霉素注射治疗耳鼻咽喉部血管瘤27例临床观察

目的 探讨平阳霉素注射治疗耳鼻咽喉部血管瘤的临床疗效和不良反应.方法 27例耳鼻咽喉部血管瘤患者均给予平阳霉素注射治疗,并观察临床疗效和不良反应.结果 全组27例患者中,治愈24例,好转3例,治愈率为88.9%,总有效率为100.0%.全组仅出现发热反应2例,给予地塞米松对症处理后好转,未出现过敏,肝、肾功能异常,肺纤维化等.结论 平阳霉素注射治疗耳鼻咽喉部血管瘤是一种简单、安全、有效的治疗方法,值得在临床上应用和推广.     

比较自体听骨与多孔高分子聚乙烯听骨对鼓室成形术后骨导听力的影响

目的　比较自体听骨与多孔高分子聚乙烯听骨对鼓室成形术后骨导听力改变的临床疗效。方法　回顾分析我科2008～2012年72例使用自体听骨与多孔高分子聚乙 烯听骨进行开放式Ⅲa型鼓室成形术听骨链重建患者的临床资料,利用纯音测听对患者手术前后0.5、1、2和4 kHz频率处的骨导听阈进行比较。结果　两组手术术前骨导听阈有提高,术后各个频率骨导听力均有改善,2 kHz最明显,其次是1 kHz;多孔高分子聚乙烯听骨植入组术后各个频率骨导听阈改善幅度大于自体听骨植入组;对两组病程小于10年与大于10年进行平均骨导听阈比较,发现病程长短在对比两组患者手术后骨导听阈改善中无统计学差异。结论　开放式Ⅲa型鼓室成形术中采用自体听骨与多孔高分子聚乙烯听骨均能改善骨导听力,后者效果更好。     

耳内镜在听骨链探查及重建中的应用

目的 研究耳内镜在听骨链探查及重建中的应用效果。方法 回顾性分析2019年2月－2021年5月该院64例（64耳）听骨链探查鼓室成形术患者的临床资料。耳内镜组采用耳内镜手术,显微镜组采用显微镜手术。结果 在病变范围未超过鼓窦的患者中,耳内镜组术中出血量少于显微镜组,手术时间和住院时间短于显微镜组,疼痛评分和不良反应率低于显微镜组,差异均有统计学意义（P < 0.05）;术后6个月,耳内镜组鼓膜愈合率为93.3%（28/30）,显微镜组鼓膜愈合率为91.2%（31/34）,两组患者均能获得较高的鼓膜愈合率以及纯音听阈均值（PTA）的改善,但组间比较,差异无统计学意义（P > 0.05）。术后在听骨链重建的患者中,耳内镜组人工听骨植入患者气骨导间距（A-B gap）缩小程度大于显微镜组,差异有统计学意义（P < 0.05）。结论 在病变未超过鼓窦的患者中,选择耳内镜手术优势较多,具有临床实用价值。     

上调lncRNA CTA-246H3.12通过调节miR-515-5p 抑制鼻咽癌细胞的增殖和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA) CTA-246H3.12在鼻咽癌组织和细胞系中的表达,研究上调CTA-246H3.12影响鼻咽癌细胞增殖和侵袭的分子机制。方法 qPCR分别检测CTA-246H3.12在鼻咽癌组织和鼻咽癌细胞系中的表达。选取CTA-246H3.12表达量最低的细胞系,分别转染阴性质粒或表达CTA-246H3.12的质粒,定义为阴性对照组和CTA-246H3.12组。MTT法和Transwell侵袭实验分别检测上调CTA-246H3.12对细胞增殖和侵袭能力的影响。生物信息学方法预测CTA-246H3.12的靶基因。qPCR和Western blot法分别检测上调CTA-246H3.12对靶基因表达的影响。结果 与慢性鼻咽炎组织比较,CTA-246H3.12在鼻咽癌组织表达下调(P<0.01)。与人永生化鼻咽上皮细胞比较,CTA-246H3.12在鼻咽癌细胞系表达下调(P<0.05),CTA-246H3.12在C666-1细胞中的表达量最低(P<0.01)。与阴性对照组比较,CTA-246H3.12组C666-1细胞的增殖能力显著降低(P<0.05),细胞侵袭能力显著降低(P<0.01)。CTA-246H3.12的靶基因可能是miR-515-5p,miR-515-5p的靶基因可能是尾侧型同源盒转录因子1(CDX1)。与阴性对照组比较,CTA-246H3.12组C666-1细胞中miR-515-5p表达显著降低(P<0.01),CDX1在mRNA和蛋白水平的表达显著增加。结论 CTA-246H3.12在鼻咽癌组织及细胞系中表达下调,上调CTA-246H3.12可明显抑制鼻咽癌C666-1细胞的增殖和侵袭能力,其分子机制可能是通过抑制miR-515-5p的表达,间接促进CDX1基因的表达。     

circRNA-ITCH通过TET1基因抑制Wnt/β-catenin 信号通路对鼻咽癌细胞增殖和侵袭的影响

目的 观察环状RNA(circRNA)-ITCH在鼻咽癌组织和细胞系中的表达,探讨circRNA-ITCH对鼻咽癌细胞增殖和侵袭的影响及其分子机制。方法 qPCR分别检测circRNA-ITCH在49例鼻咽癌组织和鼻咽癌细胞系中的表达。选取circRNA-ITCH表达最低的细胞系,分别转染阴性质粒或过表达circRNA-ITCH的质粒,定义为对照组和实验组。CCK-8法和Transwell侵袭实验分别检测过表达circRNA-ITCH对细胞增殖和侵袭能力的影响。qPCR和Western blot法分别检测过表达circRNA-ITCH对10-11转位酶1(ten-eleven translocation1,TET1)基因和Wnt/β-catenin信号通路表达的影响。结果 circRNA-ITCH在鼻咽癌组织中表达水平明显低于癌旁组织(P<0.01)。circRNA-ITCH在鼻咽癌细胞系中表达水平明显低于人永生化鼻咽上皮细胞(P<0.05),在CNE-2Z细胞中的表达水平最低(P<0.01)。与对照组比较,实验组CNE-2Z细胞的增殖能力明显降低(P<0.05),细胞侵袭能力明显降低(P<0.01)。与对照组比较,实验组CNE-2Z细胞中TET1在mRNA和蛋白水平的表达明显增加(P<0.01),Wnt1、PLC、PKC和β-catenin蛋白表达明显降低,Wnt/β-catenin信号通路被抑制。结论 circRNA-ITCH在鼻咽癌组织及细胞系中表达降低,过表达circRNA-ITCH可明显抑制鼻咽癌CNE-2Z细胞的增殖和侵袭能力,其分子机制可能是促进TET1基因的表达,抑制Wnt/β-catenin信号通路。     

lncRNA MIR34AHG通过miR-296-5p/SRCIN1轴影响喉癌细胞的恶性生物学行为

目的 探讨长链非编码RNA(lncRNA) MIR34AHG通过miR-296-5p/SRCIN1轴对喉癌细胞增殖和迁移的作用。方法 qPCR检测MIR34AHG在喉癌细胞系(TU686、Hep-2、TU177、AMC-NH-8、TU212)以及支气管上皮细胞系(16HBE)中的表达。选取MIR34AHG表达最低细胞系,分别构建MIR34AHG过表达细胞系(MIR34AHG组)和对照细胞系(对照组)。MTT法、细胞划痕实验分别检测上调MIR34AHG对细胞增殖和迁移的影响。生物信息学工具预测MIR34AHG的靶基因,双荧光素酶报告基因实验检测MIR34AHG与靶基因之间的相互作用。qPCR和Western blot法检测上调MIR34AHG对相关基因和蛋白表达的影响。结果 与16HBE细胞比较,喉癌细胞系中MIR34AHG呈低表达(P<0.01),且以TU686细胞中表达最低(P<0.01)。与对照组比较,MIR34AHG过表达抑制TU686细胞的增殖和迁移(P<0.05)。MIR34AHG和miR-296-5p之间存在靶向关系(P<0.01),miR-296-5p的靶基因可能是SRCIN1。与对照组比较,MIR34AHG过表达抑制miR-296-5p表达(P<0.01),促进SRCIN1基因的表达(P<0.01)。结论 MIR34AHG可能通过下调miR-296-5p的表达、上调SRCIN1的表达从而抑制喉癌细胞的增殖和迁移。